MMFSCNG0262 茶多酚 分光光度法
MM_FS_CNG_0262
茶、茶多酚测定
本方法适用于茶叶中茶多酚含量的测定。
在茶叶水浸出物中与亚铁离子产生络合反应的酚性化合物,均称茶多酚。
3.原理概要
茶叶中多酚类物质能与亚铁离子形成紫蓝色络合物。用分光光度法测定其含量。
4. 试剂和仪器
4.1.试剂
酒石酸亚铁溶液:称取1g(准确至0.0001g)硫酸亚铁和5g(准确至0.0001g)酒石酸钾钠,用水溶解并定容至1L(溶液应避光,低温保存,有效期一个月)。
pH7.5磷酸盐缓冲液:
磷酸氢二钠(1/15mol/L):称取23.377g磷酸氢二钠,加水溶解后定容至1L。
磷酸二氢钾(1/15mol/L):称取9.078g磷酸二氢钾,加水溶解后定容至1L。
取上述1/15mol/L的磷酸氢二钾溶液85mL和1/15mol/L的磷酸二氢钾溶液15mL混合均匀。
4.2.仪器
分析天平:感量0.0001g。
分光光度仪。
5.过程简述
5.1.取样
5.1.1.大包装茶取样
5.1.1.1.取样件数
5.1.1.1.1.取样件数按下列规定:
1~5件,取样一件;
6~50件,取样两件;
50件以上,每增加50件(不足50件者按50件计)增取一件;
500件以上,每增加100件(不足100件者按100件计)增取一件;
1000件以上,每增加500件(不足500件者按500件计)增取一件。
5.1.1.1.2.在取样时如发现茶叶品质、包装或堆存情况等有异常情况时,可酌情增加或扩大取样数量,以保证样品的代表性,必要时应停止取样。
5.1.1.2.取样步骤
5.1.1.2.1.包装前取样
即在产品包装过程中取样。在茶叶定量装件时,每装若干件(如每批1000件以上,则每装50件;1000件以下,则每装约30件)后,用取样铲取出样品约500 g。所取的原始样品盛于有盖的专用茶箱中,然后混匀,用分样器或四分法逐步缩分至500~1000g,作为平均样品,分装于1~2个茶样筒中,供检验用。
5.1.1.2.2.包装后取样
即在产品成件、打包、刷唛后取样。在整批茶叶包装完成后的堆垛中,从不同堆放位置,随机抽取规定的件数。逐件开启后,分别将茶叶全部倒在塑料布上。用取样铲各取出有代表性的样品约500g,置于有盖的专用茶箱中,混匀。用分样器或四分法逐步缩分至500~1000g,作为平均样品,分装于1~2个茶样筒中,供检验用。
5.1.2.小包装茶取样
5.1.2.1.取样件数
按照5.1.1.1.的规定取样。
5.1.2.2.取样步骤
5.1.2.2.1.包装前取样
按照5.1.1.2.1 的规定取样。
5.1.2.2.2.包装后取样
在整批包装完成后的堆垛中,从不同堆放位置随机抽取规定的件数,逐件开启。从各件内不同位置处,取出2~3盒(听、袋)。所取样品保留数盒(听、袋),盛于密闭的容器中,供单个分别检验。其余部分现场拆封,倒出茶叶,混匀。再用分样器或四分法逐步缩分至约500g,作为平均样品,装于茶筒中,供检验用。
注:袋泡茶的拆封混样工作,在检验室内进行。
5.1.3.紧压茶取样
5.1.3.1.取样件数
按照5.1.1.1 规定执行。
5.1.3.2.取样步骤
5.1.3.2.1.砖茶、饼茶取样
随机抽取规定的件数,逐件开启,从各件内不同位置处,取出1~2个(块)。除供现场检查外,单重在500g以上的,留取3个(块);500g以下的,留取5个(或块),盛于密闭的容器中,供检验用。
5.1.3.2.2.捆包的散茶取样
从各件的上、中、下部采样,再用四分法或分样器缩分至所需数量。
5.2.试样制备
5.2.1.紧压茶以外的各类茶:先用磨碎机将少量试样磨碎,弃去,再磨碎其余部分。
如果水分含量太高,不能将样品磨碎到所规定的细度,必须将样品预先干燥(烘温不超过100℃为宜)。待试样冷却后,再进行磨碎。
将磨碎样品转入预先干燥的容器中,并立即密封。
5.2.2.紧压茶:在不同形状(砖、块、饼)的紧压茶表面,分别取不少于5处的采样点,用台钻或电钻钻洞取样、混匀,按5.2.1的规定制备试样。
5.3.测定步骤
5.3.1.试液的制备
称取3 g(准确至0.001g)磨碎试样于500mL锥形瓶中,加沸蒸馏水450mL,立即移入沸水浴中,浸提45min*(每隔10min摇动一次)。浸提完毕后立即趁热减压过滤**。滤液移入500mL容量瓶中,残渣用少量热蒸馏水洗涤2~3次,并将滤液滤入上述容量瓶中,冷却后用蒸馏水稀释至刻度。
* 国际标准ISO 1574—80中是加水后回流抽提1 h,现改为沸水浴浸提45min。
* * 国际标准ISO 1574—80中是常压过滤,本方法采用减压过滤。
5.3.2.测定
准确吸取上述试液1mL,注入25mL的容量瓶中,加水4mL和酒石酸亚铁溶液5mL,充分混合,再加pH7.5的缓冲液至刻度,用10mm比色杯,在波长540nm处,以试剂空白溶液作参比,测定吸光度(A)。
6.结果计算
6.1.计算方法和公式
茶叶中茶多酚的含量,以干态质量百分率表示,按下式计算:
茶多酚(%)= | A×1.957×2 | × | L1 | ×100 |
100 | L2×M×m |
式中: L1——试液的总量,mL;
L2——测定时的用液量,mL;
M——试样的质量,g;
m——试样干物质含量百分率,%;
A——试样的吸光度;
1.957——用10 mm比色杯,当吸光度等于0.50时,每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg。
如果符合允许差的要求,则取两次测定的算术平均值作为结果。
6.2.允许差
同一样品的两次测定值之差,每100g试样不得超过0.5g。
7.结果报告
试验报告应包括下列内容:
a. 使用的方法; b. 测定的结果(取小数点后一位);
c. 本方法中未规定的或另加的操作;d. 试样的名称和产地;
e. 试验日期,操作人员。
8.来源
中国国家标准:GB 8313—87
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